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食品、油脂、飼料行業(yè)常常需要對(duì)脂肪含量進(jìn)行測(cè)定,而專(zhuān)業(yè)用于測(cè)定脂肪含量的儀器被叫做粗脂肪測(cè)定儀或者也叫做脂肪抽提儀。
脂肪測(cè)定儀應(yīng)用索氏抽提原理,用Ether或者其他有機(jī)溶劑將脂肪從樣品中溶解出來(lái),然后對(duì)其烘干、稱(chēng)重,zui后得到脂肪的含量。通過(guò)索氏抽提原理,溶解出的物質(zhì)不限于脂肪,還有葉綠素、胡蘿卜素、有機(jī)酸等,因此脂肪抽提儀有時(shí)又被叫做粗脂肪測(cè)定儀。
抽提法是測(cè)定脂肪含量zui經(jīng)典的方法,從古至今一直都沒(méi)變。只是隨著技術(shù)的進(jìn)步,索氏抽提法大大提高了效率。例如Hanon的sox500脂肪測(cè)定儀和sox406脂肪測(cè)定儀。
下面我們具體來(lái)分析下用粗脂肪測(cè)定儀對(duì)樣品進(jìn)行脂肪含量測(cè)定時(shí)需要注意的地方:
1.首先在進(jìn)行溶解前,先對(duì)樣品進(jìn)行研磨,研磨的充分程度,可以直接影響到脂肪的提取速度,研磨充分可以使脂肪更好的溶解在石油醚、Ether等有機(jī)溶劑中。
2.當(dāng)樣品被研磨后,將樣品裝入濾紙筒,此時(shí)濾紙筒一定要緊密,而且濾紙筒的高度不能超過(guò)回流彎管,否則溶劑不易穿透樣品。
3.提取時(shí)是用Ether作為脂肪的溶劑,Ether的沸點(diǎn)為40℃左右,因此溫度不要太過(guò),一般的70-85℃左右即可。
4.實(shí)驗(yàn)中使用的試劑必須是無(wú)水試劑,例如:如果實(shí)驗(yàn)中用到的是Ether,那么Ether必須使無(wú)水Ether,因?yàn)槿绻衅渌奈镔|(zhì),如水,就可能將樣品中的糖分或者無(wú)機(jī)物抽出,影響脂肪的測(cè)定結(jié)果。因此,也要保證實(shí)驗(yàn)中用到的溶劑杯以及其他物品都是干燥的。
5. 冷凝管上端連接一個(gè)氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入,而且還可以避免Ether揮發(fā)在空氣中,這樣可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染。如無(wú)此裝置,塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可。一般全自動(dòng)或者半自動(dòng)的機(jī)器在冷凝管頂部會(huì)有蓋子,這樣也能很好的起到保護(hù)實(shí)驗(yàn),避免溶劑揮發(fā)的效果。
6.用脂肪抽提儀對(duì)脂肪進(jìn)行充分抽提后,就可以對(duì)樣品及醚提出物進(jìn)行烘干或者對(duì)溶劑杯進(jìn)行烘干。烘干時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),因?yàn)橐恍┎伙柡椭舅幔菀自诩訜徇^(guò)程中被氧化而影響脂肪測(cè)定的zui終結(jié)果。在沒(méi)有真空干燥箱的條件下,可以在100-105℃下干燥1.5-3小時(shí)。
以上六點(diǎn)是在用粗脂肪測(cè)定儀測(cè)量脂肪含量時(shí)該注意的地方。脂肪抽提儀是專(zhuān)門(mén)針對(duì)樣品中脂肪含量進(jìn)行測(cè)定,另外粗纖維測(cè)定儀也常用于食品檢測(cè),粗纖維含量是判斷食品的品質(zhì)的一個(gè)參數(shù),因?yàn)橐渤?yīng)用在食品檢測(cè),當(dāng)然,糧食、飼料、谷物和其他農(nóng)副產(chǎn)品的粗纖維含量、粗脂肪含量測(cè)定,都會(huì)依賴(lài)這兩款儀器。專(zhuān)門(mén)用于測(cè)定粗纖維的儀器有粗纖維測(cè)定儀,利用的是酸堿消煮法原理,例如Hanon的F600粗纖維測(cè)定儀。
zui后是用戶(hù)比較關(guān)心的幾個(gè)問(wèn)題:
1.脂肪抽提儀是采用什么加熱方式?
答:脂肪抽提儀有兩種加熱方式:水浴鍋加熱和電熱板加熱。其中電熱板加熱的zui大好處是加熱快,能夠一下子將溫度升高到的要求,而水浴鍋加熱能夠保證加熱均勻,避免不必要的損失。
2.在做脂肪測(cè)定實(shí)驗(yàn)時(shí),脂肪抽提儀里的兩水面不一樣高,是什么原因?
答:用脂肪抽提儀或者粗脂肪測(cè)定儀測(cè)量樣品中脂肪的含量時(shí),溶解樣品的有機(jī)溶劑一般采用Ether。Ether的沸點(diǎn)為40℃左右,而上面實(shí)驗(yàn)中它的溫度達(dá)到了90度,大大超過(guò)了Ether的沸點(diǎn),導(dǎo)致Ether蒸發(fā)加快,冷凝跟不上蒸發(fā)速度,因此會(huì)有壓差,導(dǎo)致內(nèi)外管的水面高度不一。
3.脂肪抽提儀一次性可以對(duì)幾個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)定?
脂肪抽提儀有六個(gè)試管,每個(gè)管都有單獨(dú)的按鍵進(jìn)行控制,因此zui后可同時(shí)測(cè)定六個(gè)樣品。